Opóźnione dojrzewanie i hipogonadyzm powodowany przez mutacje w genie-podjednostki hormonu folikulotropowego ad

Panel B pokazuje pełny rodowód, odzwierciedlający płodność heterozygot. Kwadraty oznaczają męskich członków rodziny i kręcą kobiece członki rodziny. Proband (przedmiot II-1 na rys. 1A i 1B) przedstawiony jako 15 11/12 lat z pierwotnym brakiem miesiączki. W wieku 13 lat przeszła proces wydawania moczu, ale nie miała żadnych dowodów na to, że jest. Miała 155 cm wzrostu, z kością 14 lat. Rozwój piersi był etapem Tannera i nie było hirsutyzmu. Rozwój piersi indukowano przez leczenie estrogenem, a następnie leczono ją doustnym środkiem antykoncepcyjnym. Nie było rodzinnej historii opóźnionego dojrzewania, bezpłodności lub pokrewieństwa (ryc. 1B).
Otrzymano następujące wyniki badań laboratoryjnych: FSH surowicy, <0,5 mIU na mililitr (norma, 2,0 do 17,2); hormon luteinizujący, 21 mIU na mililitr (norma, 1,6 do 9,3); prolaktyna, 8,9 ng na mililitr (norma, <18); tyreotropina, 0,71 .U na mililitr (norma, 0,5 do 4,5); estradiol, <25 pg na mililitr (<92 pmol na litr, normalny, 25 do 400 pg na mililitr [92 do 1468 pmol na litr]); i testosteron, 29 ng na decylitr (1 nmol na litr, normalny, 23 do 75 ng na decylitr [0,8 do 2,6 nmol na litr]). Po dożylnym podaniu 100 .g hormonu uwalniającego gonadotropiny stężenie hormonu luteinizującego w surowicy wzrosło z 33 mIU na mililitr do 170 mIU na mililitr w 30 minut i 130 miu na mililitr w ciągu 60 minut. Przeciwnie, stężenie FSH w surowicy wynosiło 0,6 mIU na mililitr na linii podstawowej, 0,6 mIU na mililitr przy 30 minutach i 0,8 miu na mililitr przy 60 minutach. Rezonans magnetyczny mózgu i przysadki nie ujawnił żadnych nieprawidłowości.
Do oznaczenia FSH w surowicy użyto testu immunoenzymatycznego mikrocząstek IMX (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL). Wewnętrzny współczynnik współczynnika zmienności wynosił mniej niż 4 procent, a współczynnik zmienności między testami wynosił 7 procent dla średniej wartości 5 mIU na mililitr. Dolna granica wykrywalności wynosiła 0,2 mIU na mililitr. Hormon luteinizujący mierzono również za pomocą testu immunoenzymatycznego z mikrocząstkami, a inne hormony mierzono za pomocą oznaczeń radioimmunologicznych. Trzydzieści cztery normalne podmioty (18 kobiet i 16 mężczyzn) służyły jako kontrole. Badanie zostało zaaprobowane przez komisje ds. Przeglądu instytucjonalnego w Tufts University i University of Chicago. Uzyskano świadomą zgodę wszystkich badanych członków rodziny.
Sekwencjonowanie DNA i ekspresja zmutowanego rekombinowanego Fsh
DNA wyekstrahowano z leukocytów krwi obwodowej, a wszystkie trzy egzony z genu podjednostki . FSH zamplifikowano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), jak opisano poprzednio. Fragmenty PCR przeszukiwano pod kątem mutacji za pomocą elektroforezy w żelu denaturującym. Denaturanty stanowiły 7 M mocznik i 40% formamid, a żele były prowadzone w temperaturze 60 ° C. Produkty PCR poddano elektroforezie przez 1100 woltów w żelach od 20 do 80 procent (eksony i 3) i 800 woltów w żelach od 0 do 60 procent (ekson 2).
Fragmenty Exon 3 klonowano zestawem TA Cloning Kit (Invitrogen, San Diego, CA) i każdą nić sekwencjonowano co najmniej cztery razy techniką [35S] dideoksy (SequiTherm Cycle Sequencing kit, Epicentre Technologies, Madison, Wis.) .
Dziki i zmutowany gen podjednostki . FSH ulegał ekspresji w transfekowanych komórkach w celu oceny syntezy i wydzielania hormonu in vitro
[patrz też: nutrend, atropina, anastrozol ]
[patrz też: choroba scheuermanna operacja, allegro hantle, co decyduje o stopniu zagrożenia życia poparzonego ]