Pochodzenie ziarniniakowej dominującej limfocytu z klonalnej ekspansji wysoko zmutowanych komórek B zarodkowego jądra czesc 4

Pokonaliśmy tę trudność, zmniejszając objętość buforu użytego w zawieszeniu pojedynczych komórek. Przy tej technicznej modyfikacji żadna z 959 próbek pobranych z bufora pokrywającego zamrożone sekcje po wyizolowaniu każdej komórki nie zawierała produktów amplifikacji specyficznych dla VH, i tylko z 84 komórek T izolowanych z odcinków tkanki od pacjentów z dominującą guzkową chorobą limfocytową choroba Hodgkina dała produkt PCR. Co więcej, 260 komórek B izolowanych z zamrożonych skrawków hiperplastycznych migdałków i próbek tkanek dotkniętych chorobą dało początek 102 produktom PCR z niespokrewnionymi genami VH. Sekwencja CDR3 jest sygnaturą molekularną komórki B, ponieważ losowo wybrane nukleotydy są wstawiane w trakcie przegrupowania VH. Żadna z sekwencji VH pochodzących z klonalnych komórek L & H, które badaliśmy była homologiczna z sekwencjami, które badaliśmy poprzednio lub z sekwencjami CDR3 w banku danych. Pojedyncza rearanżacja VH w próbce pochodzącej od Pacjenta 3, która nie była związana z wysoce zmutowaną klonalną populacją komórek L & H, pochodzi prawdopodobnie z sąsiedniej komórki B, o czym świadczy brak mutacji somatycznych w przegrupowanym genie VH. To, że dwie próbki biopsyjne z Pacjenta uzyskane w odstępie dziewięciu miesięcy zawierały identyczne przegrupowania VH, zapewnia dalsze wsparcie dla ważności naszej metody.
Fizjologicznie mutacje somatyczne wprowadzane są do genów V immunoglobulin na etapie centroblastycznym różnicowania komórek B w centrach zarodkowych podczas odpowiedzi immunologicznej.29,30 W tym procesie komórki B nabywają receptory immunoglobulin o wyższym lub niższym powinowactwie do antygenu. Komórki B o wysokim powinowactwie są wybierane przez antygen w celu dalszego różnicowania się w komórki pamięci B i komórki plazmatyczne30. Komórki te mają niską do umiarkowanej liczbę mutacji somatycznych (do 6 procent) .29 W przeciwieństwie do receptorów na komórkach B które mają wysoce zmutowane geny V tracą powinowactwo do antygenu i ulegają apoptozie30. W naszym badaniu wysoki ładunek mutacji somatycznych (7,5 do 27,2 procent) we wszystkich 11 przypadkach guzkowej choroby dominującej limfocytów i oznaki trwającej mutacji w 6 z tych przypadków sugeruje, że komórki L & H są oporne na te mechanizmy fizjologiczne, być może ze względu na blok w szlaku apoptotycznym. Obecność u dwóch pacjentów komórek L & H z zaburzoną zdolnością do kodowania przez geny immunoglobulin potwierdza tę teorię, ponieważ zazwyczaj takie komórki B nie mogą przetrwać.
Dowody na to, że komórki L & H są spokrewnione z limfocytami B w centrach zarodkowych lub ich potomstwie obejmują wzór mutacji genu VH, spójne powiązanie komórek L & H z progresywnie transformowanymi centrami zarodkowymi, 31 dystrybucję komórek L & H w obrębie tych struktur, ekspresję komórek antygeny charakterystyczne dla centrum rozrodczego, 32-34 i podobieństwo komórek L & H do dużych centroblastów. Nasze odkrycia pokazują, że komórki L & H powstają z pojedynczego klonu komórek B zarodkowych.
Chociaż nasze dane są ograniczone, a geny V łańcucha L łańcucha lekkiego nie są zsekwencjonowane, wydaje się, że zmienione w czasie geny V w komórkach L & H i komórki Reeda-Sternberga przeszły w podobnym stopniu mutację somatyczną21 (i to badanie)
[więcej w: dekstrometorfan, dienogest, Białkomocz ]
[podobne: bazofile poniżej normy, ginekolog kraków ruczaj, bliznowiec po operacji ]