Pojedyncza mutacja nukleotydowa w mysim promotorze reniny zakłóca regulację ciśnienia krwi ad 8

Wartości ekspresji u samców WT określono arbitralnie na 1,0. Liczby rzymskie odnoszą się do genotypów przedstawionych w A. Ekspresja BAC T Ren-1C pod nieobecność endogennych genów reniny. Przeanalizowaliśmy ekspresję genu reniny w nerce myszy złożonej za pomocą analizy Northern blot (Figura 5C). Endogenna ekspresja genu Ren-1C nie była wykrywalna w Ren-1C. /. myszy, a Ren-1C + /. lub myszy kontrolne WT (Ren-1C + / +) wyrażały wysokie poziomy, które były nieodróżnialne od siebie (Figura 5C) (29). W TgWT CNRE BAC: Ren-1C. /. lub TgWT RP-2 BAC: Ren-1C. /. (Figura 5C) myszy, obserwowano ekspresję genów Ren-1C na poziomach podobnych do tych u zwierząt heterozygotycznych (Ren-1C + / y) lub homozygotycznych (Ren-1C + / +) dla nienaruszonego allelu Ren-1C. Co istotne, analiza hybrydyzacji in situ myszy z WT BAC-Tg: Ren-1Cpull wykazała, że ekspresja Tg Ren-1C była ograniczona do komórek JG nerki (dane nie przedstawione). Poziom ekspresji genu Tg Ren-1C w nerce Tgmut CNRE BAC: Ren-1C. /. mysz była porównywalna do tej obserwowanej w TgWT CNRE BAC: Ren-1C. /. mysz (Figura 5C), która jest zgodna z profilem ekspresji CNRE BAC TgM w obecności endogennego allelu (Figury 3 i 4). W Tgmut RP-2 BAC: Ren-1C. /. mysz (Figura 5C), Tg nie udało się uratować ekspresji genu reniny (Figura 5C). Jest to zgodne z obserwacją, że mutant locus RP-2 nie reaguje na niedociśnienie indukowane przez kaptopryl (Figura 4C). Ratowanie PRA, zawartość AI w osoczu i BP. Następnie zmierzono PRA (Figura 5D) i stężenie AI w surowicy (Figura 5E) w myszach w teście za pomocą testów radioimmunologicznych. Zgodnie z oczekiwaniami z ekspresji genu reniny nerkowej (Figura 5C), parametry te zostały uratowane w TgWT CNRE BAC: Ren-1C P / t, TgWT RP-2 BAC: Ren-1C P / t, i Tgmut CNRE BAC: Ren-1C . /. myszy (Figura 5, D i E). Te parametry były statystycznie nie do odróżnienia od tych w Ren-1C + /. mysz. Warto zauważyć, że zarówno zawartość PRA i AI była poniżej wykrywalnego poziomu w Tgmut RP-2 BAC: Ren-1C. /. mysz (rysunek 5, D i E), tak jak w Ren-1C. /. mysz. Następnie zmierzyliśmy SBP zwierząt metodą tail-cuff (Figura 5F). SBP z TgWT CNRE BAC: Ren-1C. /. i TgWT RP-2 BAC: Ren-1C. /. myszy złożone (WT) były porównywalne z tymi dla Ren-1C + /. jak również zwierząt WT (Ren-1C + / +, dane nie przedstawione). Podczas gdy SBP z Tgmut CNRE BAC: Ren-1C. /. myszy były normalne, Tgmut RP-2 BAC: Ren-1C. /. myszy wykazywały fenotyp hipotensyjny (figura 5F) z BP podobnymi do tych z Ren-1C. /. myszy i 20. 25 mmHg niższe niż w przypadku Ren-1C + /. myszy (1). Fenotyp BP obserwowany u zwierząt złożonych korelował ze wzorem ekspresji genu Tg Ren-1C w nerce (Figura 5C). Porównaliśmy także ekspresję genu Tg Ren-1C w tkankach nadnercza (jądra, jajniki, SMG i nadnercze) TgWT RP-2 BAC: Ren-1C. /. i Tgmut RP-2 BAC: Ren-1C. /. złożone myszy (Figura 5G). Małe, ale znaczące różnice obserwowano w jądrach i jajnikach, gdzie ekspresja była odpowiednio 30% i 50% niższa u zwierząt z mutacją. Nie zaobserwowano istotnej różnicy w ekspresji genu Tg Ren-1C w SMG lub nadnerczach. Tak więc, brak PRA i niskie BP w Tgmut RP-2 BAC: Ren-1C. /. u myszy najprawdopodobniej można przypisać prawie całkowitą utratę ekspresji genu reniny w nerce. Dyskusja Badania wykorzystujące hodowane komórki zidentyfikowały dużą liczbę potencjalnych elementów cis-regulatorowych w regionie proksymalnego promotora reniny
[podobne: chondropatia rzepki, razer kraken allegro, wesołe skrzaty pobiedziska ]