Środek kontrastowy rozpoznający aktywowane płytki krwi ujawnia mysią patologię malarii mózgowej niewykrywalną za pomocą konwencjonalnego MRI ad 6

Komórki ED-1 (3-dodatnie przylegające do światła naczynia wizualizowano stosując immunohistochemię podwójnie znakującą (Figura 7I): naczynia były umiejscowione przy użyciu przeciwciała przeciwko GLUT-1, markerowi, którego ekspresja została ustalona zarówno na częściach luminalnych, jak i podśluzówkowych. układ naczyniowy mózgu (22), razem z przeciwciałem przeciwko ED-1. Odkrycia te potwierdzono za pomocą immunofluorescencji i skaningowej mikroskopii konfokalnej z laserem (Figura 7J). Co ciekawe, mikroskopia konfokalna GLUT-1 ujawniła, że płytki wiążą się z nienaruszonym śródbłonkiem, co było nieoczekiwane. Figura 7 Nagromadzenie płytek i leukocytów w mózgu po wstrzyknięciu TNF w wstrzyknięcie. (A) Do góry: Płytki krwi zlokalizowane w naczyniu krwionośnym w mózgu w pobliżu miejsca iniekcji (brązowe, DAB), wizualizowane za pomocą kontrastu krezolowego. Dół: immunocytochemia z potrójnym znakowaniem zidentyfikowała płytki (czerwone) i komórki ED-1 (dodatnie (zielone) w naczyniu z nienaruszonym śródbłonkiem, jak ujawniono przez barwienie GLUT1 (niebieskie). (B) Liczba elementów pozytywnych dla GPIIb / IIIa w wstrzykniętej półkuli po mikroiniekcji do prążkowia 1. G TNF (romby), ng IL-1 (trójkąty) lub solanka (kwadraty) w objętości 1. L dla szczurów lub 0,5 .l dla myszy. (C = E) Całkowite leukocyty mózgowe, zidentyfikowane przez wspólny antygen leukocytów (LCA, C), rekrutowane monocyty dodatnie pod względem ED-1 (3 i aktywowane komórki mikrogleju obecne w miąższu mózgu (D), oraz dodatnie rekrutowane monocyty związane z ED-1 (3 z częściami świecenia układu naczyniowego mózgu (E), wykrytymi metodą immunohistochemiczną w ciągu 24 godzin po wstrzyknięciu TNF (kwadraty) lub nośnikiem soli fizjologicznej (diamenty). (F. H) Reprezentatywne fotografie pokazujące brak leukocytów w oponach (F) lub miąższu (G) i ich obecność w miąższu po wstrzyknięciu TNF (H) po oznaczeniu immunohistochemicznym dla wspólnego antygenu leukocytów. (I. L) Podwójnie znakowana immunocytochemia (I i K) i obrazowanie konfokalne (J i L) komórek ED-1. Dodatnich i naczyń krwionośnych mózgu (zidentyfikowanych przez GLUT-1) podkreślają różnice we wzorcach rekrutacji komórek jednojądrzastych w miąższ (I i J) i opon mózgowych (K i L). W przypadku opon mózgowych należy zauważyć obecność dużej liczby komórek pozytywnych pod względem ED-1 (niebieski, VIP, czerwony, FITC), które wydają się mieć wolny pasaż z układu naczyniowego (brązowy, DAB, niebieski, AF-636) w porównaniu z tymi samymi komórkami w miąższu, który wydaje się powiązany z naczyniem. (K, wstawka) Widok wysokoenergetycznych komórek zewnątrznaczyniowych ED-1-dodatnich. Wyniki ELISA są wyrażone jako pg MCP-1 / mg białka całkowitego. SEM. Liczby komórek w mózgu są wyrażone na mm2. SEM. * P <0,05 w porównaniu do kontroli pojazdu. Pręty skali: 20 m (A i F. J); 40 m (K i L); 10 m (K, wstawka). W oponach zrekrutowanych jednojądrzastych komórek ED-1p pozytywne obserwowano już po 2 godzinach po wstrzyknięciu TNF-ji i znacznie wzrosły w ciągu 24 godzin (dane nie przedstawione). Ruch jednojądrzastych komórek dodatnich pod względem ED-1. Przez mezenizację opon oponowych wydawał się nieograniczony, ponieważ duża liczba komórek ED-1. Pozytywnych była obserwowana abluminally (Figura 7K). Odkrycia te poparte zostały immunofluorescencją i mikroskopią konfokalną (ryc. 7L). Chociaż nie obserwowano w miąższu mózgu, neutrofile znaleziono w oponach. Odkrycia te dotyczyły również splotu naczyniówkowego, w którym podobną ostrą odpowiedź zapalną obserwowano po 2 godzinach i zwiększono do 24 godzin (dane nie przedstawione). Omówienie Zgłaszamy zastosowanie funkcjonalnego specyficznego dla aktywacji kontrastowego środka płytkowego do wykrywania adhezji płytek krwi in vivo. Zastosowanie tego ukierunkowanego środka kontrastowego, który uważamy za nowy, znacznie przyczyniło się do zrozumienia mechanizmu aktywacji płytek krwi w patologii CM [hasła pokrewne: bol zeba po leczeniu kanalowym, razer kraken allegro, chondropatia rzepki ]